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試劑盒
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林可霉素ELISA檢測試劑盒

檢測項目:抗生素

適用樣本:畜禽、水產(chǎn)類動物組織

規(guī)格
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產(chǎn)品介紹
概述

概要

林可霉素屬于林可胺類窄譜抗生素,能抑制細菌蛋白質(zhì)的 合成,細菌對本品以及其他大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥有部分交叉耐藥 性。林可霉素可能導(dǎo)致肝臟損害、過敏反應(yīng)和心血管反應(yīng),經(jīng) 動物代謝后,可能殘留于組織樣本中。 本試劑盒是應(yīng)用 ELISA 技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測產(chǎn)品, 與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優(yōu)點, 能限度地減少工作強度和操作誤差。?


實驗原理?

本試劑盒采用間接競爭 ELISA 方法,在酶標板微孔條上 預(yù)包被林可霉素抗原,樣本中林可霉素和此抗原競爭林可霉素 抗體(抗試劑),同時林可霉素抗體與酶標二抗(酶標物)相 結(jié)合,經(jīng) TMB 底物顯色,樣本的吸光度值與林可霉素的含量 呈負相關(guān),與標準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得 出樣本中林可霉素的含量。


適用范圍?

可定性、定量檢測畜禽、水產(chǎn)類動物組織中林可霉素的含量。


檢測步驟


樣本前處理步驟

請參考說明書,不同樣本,步驟不同


檢測步驟?

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷凍。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、編號:將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標 準品做 2 孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。?

5、加標準品/樣本:加入標準品或樣本 50μL 到對應(yīng)的微孔中, 再加入林可霉素酶標物 50μL/孔,最后加入林可霉素抗試 劑 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避 光環(huán)境中反應(yīng) 30min。?

6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液 250μL/ 孔,充分洗滌 4~5 次,每次間隔 10s,在吸水紙上拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。?

7、顯色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加入底物液 B 液 50μL/ 孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環(huán)境中 反應(yīng) 15min。?

8、測定:加入終止液 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標儀 于 450nm 處(建議用雙波長 450/630nm 檢測,請在 5min 內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔 OD 值 (若無酶標儀,則不加終 止液用目測法可進行判定)。?


結(jié)果判定?

請使用專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、 快速分析(歡迎來電索取)。

注意事項
1、試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導(dǎo)致所有標準的OD 值偏低。 2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。 3、每加一種試劑前需將其搖勻。 4、反應(yīng)終止液為 2M 硫酸,避免接觸皮膚。 5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。 6、儲存條件:保存試劑盒于 2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進錫箔袋重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。 7、試劑變質(zhì)的跡象 :發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0 標準的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。 8、在加入底物液 A 液和底物液 B 液后,一般顯色時間為 15min 即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到 20min,但不得超過20min。反之,則減短反應(yīng)時間。 9、濃縮洗滌液如有結(jié)晶屬正?,F(xiàn)象,請加熱溶解后使用。 10、該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為 25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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