概要
林可霉素屬于林可胺類窄譜抗生素,能抑制細菌蛋白質(zhì)的 合成,細菌對本品以及其他大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥有部分交叉耐藥 性。林可霉素可能導(dǎo)致肝臟損害、過敏反應(yīng)和心血管反應(yīng),經(jīng) 動物代謝后,可能殘留于組織樣本中。 本試劑盒是應(yīng)用 ELISA 技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測產(chǎn)品, 與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優(yōu)點, 能限度地減少工作強度和操作誤差。?
實驗原理?
本試劑盒采用間接競爭 ELISA 方法,在酶標板微孔條上 預(yù)包被林可霉素抗原,樣本中林可霉素和此抗原競爭林可霉素 抗體(抗試劑),同時林可霉素抗體與酶標二抗(酶標物)相 結(jié)合,經(jīng) TMB 底物顯色,樣本的吸光度值與林可霉素的含量 呈負相關(guān),與標準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得 出樣本中林可霉素的含量。
適用范圍?
可定性、定量檢測畜禽、水產(chǎn)類動物組織中林可霉素的含量。
樣本前處理步驟
請參考說明書,不同樣本,步驟不同
檢測步驟?
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷凍。?
3、洗滌液在使用前也需回溫。?
4、編號:將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標 準品做 2 孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。?
5、加標準品/樣本:加入標準品或樣本 50μL 到對應(yīng)的微孔中, 再加入林可霉素酶標物 50μL/孔,最后加入林可霉素抗試 劑 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避 光環(huán)境中反應(yīng) 30min。?
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液 250μL/ 孔,充分洗滌 4~5 次,每次間隔 10s,在吸水紙上拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。?
7、顯色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加入底物液 B 液 50μL/ 孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環(huán)境中 反應(yīng) 15min。?
8、測定:加入終止液 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標儀 于 450nm 處(建議用雙波長 450/630nm 檢測,請在 5min 內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔 OD 值 (若無酶標儀,則不加終 止液用目測法可進行判定)。?
結(jié)果判定?
請使用專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、 快速分析(歡迎來電索取)。