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地克珠利ELISA檢測試劑盒原理以及注意事項(xiàng)

2024-05-15 14:59瀏覽量:300

地克珠利ELISA檢測試劑盒是一種用于檢測地克珠利殘留量的試劑盒,采用了酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理。這種試劑盒具有特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高、快速簡便等優(yōu)點(diǎn),可定性、定量檢測動物雞肉、飼料樣本中地克珠利的含量


地克珠利是一種新型、高效、低毒的抗球蟲藥,廣泛用于雞球蟲病的治療。然而,由于其在動物體內(nèi)的代謝和排泄,可能會對環(huán)境和人體健康造成潛在危害。因此,對地克珠利殘留量的檢測具有重要的意義。


地克珠利ELISA檢測試劑盒的操作步驟一般包括以下幾個步驟:

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷凍。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo) 準(zhǔn)品做 2 孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。?

5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本 50μL 到對應(yīng)的微孔中, 再加入地克珠利酶標(biāo)物 50μL/孔,再加入地克珠利抗試劑 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環(huán)境 中反應(yīng) 30min。 6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌液 250μL/ 孔,充分洗滌 4~5 次,每次間隔 10s,用吸水紙拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。

7、顯色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加底物液 B 液 50μL/ 孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環(huán)境中反應(yīng) 15min。?

8、測定:加入終止液 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀 于 450nm 處(建議用雙波長 450/630nm 檢測,請在 5min 內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔 OD 值(若無酶標(biāo)儀,則不加終 止液用目測法可進(jìn)行判定)


地克珠利ELISA檢測試劑盒在使用時需要注意以下事項(xiàng):

  1. 嚴(yán)格遵循說明書:務(wù)必按照試劑盒附帶的說明書嚴(yán)格操作,不得隨意更改實(shí)驗(yàn)步驟和條件。

  2. 樣本準(zhǔn)備:樣本采集和處理應(yīng)按照說明書規(guī)定進(jìn)行,確保樣本的新鮮、無污染,并避免反復(fù)凍融。

  3. 試劑保存:所有試劑在使用前都應(yīng)達(dá)到室溫,并避免陽光直射和高溫。未使用的試劑應(yīng)存放在推薦的溫度下,并遵循保存期限。

  4. 操作時間:注意加樣和孵育的時間,過長或過短的時間都可能影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  5. 加樣準(zhǔn)確性:使用加樣器時要準(zhǔn)確、迅速,避免加樣過程中的交叉污染和氣泡產(chǎn)生。

  6. 洗滌步驟:洗滌過程應(yīng)充分且徹底,避免未結(jié)合的試劑殘留在微孔板上,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

  7. 顯色與測定:顯色劑應(yīng)在臨用前配制,并避免長時間暴露于空氣中。測定時應(yīng)使用酶標(biāo)儀,確保讀數(shù)準(zhǔn)確。

  8. 安全防護(hù):地克珠利可能對人體健康有潛在影響,因此操作時應(yīng)佩戴手套、護(hù)目鏡等防護(hù)設(shè)備,避免直接接觸試劑。

  9. 廢物處理:實(shí)驗(yàn)后產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理規(guī)定進(jìn)行妥善處理,避免對環(huán)境造成污染。

  10. 質(zhì)量控制:每次實(shí)驗(yàn)都應(yīng)包括質(zhì)控品,以監(jiān)測實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

  11. 記錄與解讀:實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)詳細(xì)記錄每一步驟和結(jié)果,以便后續(xù)分析和解讀。解讀結(jié)果時應(yīng)結(jié)合質(zhì)控品的結(jié)果進(jìn)行綜合考慮。