2024-05-16 17:29瀏覽量:380
磺胺類快速檢測(cè)卡采用了熒光側(cè)向免疫層析(Fluorescent Lateral Flow,FLF)方法學(xué)原理,這是一種結(jié)合了免疫學(xué)和色譜技術(shù)的檢測(cè)方法。
下面我將詳細(xì)解釋其工作原理:
樣品與抗體的結(jié)合:當(dāng)將待測(cè)樣品滴加在試紙條的加樣區(qū)時(shí),樣品中的磺胺類分子會(huì)與結(jié)合墊中的熒光微球標(biāo)記磺胺類抗體發(fā)生特異性結(jié)合。這種結(jié)合是通過磺胺類分子與磺胺類抗體之間的抗原-抗體反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的。
毛細(xì)作用下的層析:結(jié)合后的磺胺類分子-熒光微球標(biāo)記抗體復(fù)合物在毛細(xì)作用下向前移動(dòng),經(jīng)過試紙條上的層析材料。層析材料通常是一種具有多孔結(jié)構(gòu)的載體,它能夠使樣品中的不同組分按照一定的速率分離和遷移。
抗原-抗體結(jié)合反應(yīng):當(dāng)復(fù)合物移動(dòng)到檢測(cè)區(qū)(T線)時(shí),檢測(cè)線上固定的磺胺類抗原會(huì)與剩余未結(jié)合的熒光微球標(biāo)記磺胺類抗體結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物。這個(gè)過程中,熒光微球作為信號(hào)標(biāo)記物,使得復(fù)合物能夠被熒光讀數(shù)儀檢測(cè)到。
熒光信號(hào)與磺胺類濃度的關(guān)系:檢測(cè)線T線上結(jié)合的熒光微球標(biāo)記磺胺類抗體的量與樣品中磺胺類的濃度成反比。也就是說,當(dāng)樣品中磺胺類的濃度較高時(shí),更多的磺胺類分子會(huì)與抗體結(jié)合,導(dǎo)致檢測(cè)線上結(jié)合的熒光微球標(biāo)記抗體減少,熒光信號(hào)減弱。相反,當(dāng)磺胺類濃度較低時(shí),檢測(cè)線上的熒光信號(hào)會(huì)相對(duì)較強(qiáng)。
熒光讀數(shù)儀的讀取與計(jì)算:層析結(jié)束后,使用熒光讀數(shù)儀分別讀取T線和C線(質(zhì)控線)的熒光強(qiáng)度。質(zhì)控線的熒光強(qiáng)度用于驗(yàn)證檢測(cè)過程的有效性。然后,通過計(jì)算T/C值(即檢測(cè)線與質(zhì)控線熒光強(qiáng)度的比值),結(jié)合儀器內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可計(jì)算出樣品中磺胺類的含量。
陰陽性的判斷:根據(jù)計(jì)算出的磺胺類含量與預(yù)設(shè)的閾值進(jìn)行比較,可以判斷樣品是否呈陽性(即含有磺胺類)或陰性(不含磺胺類)。
磺胺類熒光定量快速檢測(cè)卡主要適用于快速定量檢測(cè)各類樣品中磺胺類的殘留濃度。具體來說,其適用范圍包括但不限于以下幾個(gè)方面:
乳品:檢測(cè)乳品中的磺胺類殘留,確保乳品質(zhì)量安全。
畜禽、水產(chǎn):適用于畜禽肌肉、肝臟、魚肉、蝦肉等組織中的磺胺類藥物殘留篩查,保障畜禽和水產(chǎn)品的食品安全。
蜂蜜、飼料:同樣可用于檢測(cè)蜂蜜和飼料中的磺胺類殘留,確保這些產(chǎn)品的安全和合規(guī)性。
這種磺胺類熒光定量快速檢測(cè)試紙條具有操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高和特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)和藥物殘留檢測(cè)等領(lǐng)域。
磺胺類熒光定量快速檢測(cè)卡的檢測(cè)流程通常包括以下步驟:
準(zhǔn)備階段:
完整閱讀使用說明書,確保了解所有操作步驟和注意事項(xiàng)。
將未開封的檢測(cè)卡和待檢樣本溶液回復(fù)至常溫。
加樣:
從包裝袋中取出檢測(cè)卡后盡快使用。
將檢測(cè)卡平放,用滴管吸取待檢樣品溶液,垂直滴加3~4滴(根據(jù)具體說明書的指導(dǎo)量)于加樣孔中。
計(jì)時(shí)與等待:
加樣后開始計(jì)時(shí),等待層析反應(yīng)發(fā)生。
讀取結(jié)果:
結(jié)果應(yīng)在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)讀取,通常為5~10分鐘。超過15分鐘后判讀可能無效。
讀取結(jié)果時(shí),檢測(cè)卡應(yīng)水平置于觀察者正面。
觀察檢測(cè)卡上的T線(測(cè)試線)和C線(質(zhì)控線)的顯色情況。
結(jié)果判斷:
陰性(-):T線顯色,表明樣品中磺胺類濃度低于檢測(cè)限或不含磺胺類殘留。
陽性(+):T線無顯色或顏色極淺,表明樣品中磺胺類濃度高于檢測(cè)限。
無效:未出現(xiàn)C線,可能操作不當(dāng)或檢測(cè)卡已失效。在此情況下,應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書,并用新的檢測(cè)卡重新測(cè)試。
記錄與報(bào)告:
記錄檢測(cè)結(jié)果,并根據(jù)需要打印或保存檢測(cè)報(bào)告。
上一篇: 克百威快速檢測(cè)卡的原理是什么
下一篇: 腹瀉性貝類毒素ELISA試劑盒的原理