概要
蛋白酶是催化乳蛋白水解的酶類，分內(nèi)源、外源兩類，其活性直接反映牛乳蛋白降解程度，活性過(guò)高會(huì)引發(fā)乳清析出、質(zhì)地變軟、風(fēng)味發(fā)苦等品質(zhì)劣變問(wèn)題，還會(huì)縮短產(chǎn)品貨架期。同時(shí)，蛋白酶尤其是微生物來(lái)源的蛋白酶，可間接反映牛奶的微生物污染狀況，避免有害菌污染帶來(lái)的食品安全風(fēng)險(xiǎn)。
蛋白酶檢測(cè)試劑盒能夠快速檢測(cè)蛋白酶活性,為乳制品加工提供關(guān)鍵工藝參數(shù)，保障奶酪凝乳、酸奶發(fā)酵等工序的穩(wěn)定性，也可驗(yàn)證滅菌、冷藏等保鮮工藝的實(shí)施效果，為生產(chǎn)工藝優(yōu)化和質(zhì)量溯源提供數(shù)據(jù)支撐。
實(shí)驗(yàn)原理
蛋白酶在一定條件下水解酪蛋白產(chǎn)生含有酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)，在堿性條件下將福林試劑還原，生成鉬藍(lán)與鎢藍(lán)，通過(guò)測(cè)試產(chǎn)物的的吸光度，從而獲得產(chǎn)物中酪氨酸的含量，并計(jì)算獲得蛋白酶的活性數(shù)據(jù)。
適用范圍
可檢測(cè)生鮮奶、滅菌乳、發(fā)酵乳中蛋白酶的活性。
溶液的配制
請(qǐng)參考說(shuō)明書操作
樣本前處理步驟
樣本處理前須知
處理任何樣本時(shí)，都必須注意:
(a)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時(shí)需更換吸頭。
(b)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否潔凈，必須使用潔凈實(shí)驗(yàn)器具，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(C)處理好的樣本應(yīng)立即用于檢測(cè)。
檢測(cè)步驟:
1、在2m1離心管中加入 500μL.0.4mol/L 碳酸鈉溶液;然后加入樣品清液或標(biāo)曲 100mL. 每管。
2、加入福林溶液 100mL 每管，加入同時(shí)吸打混勻。
3、全部放入到4010.2°C水浴20 分鐘 。完畢后10000 轉(zhuǎn)1分離心10分鐘。(或室溫靜置至澄清)
4、取上清200μL轉(zhuǎn)移到微孔板中讀數(shù)(620-680nm)
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